前言在臨床檢驗(yàn)應(yīng)用中能夠準(zhǔn)確檢測(cè)出血中鉛含量的的儀器是保障職業(yè)安全和公共衛(wèi)生的可靠支持。美國(guó)疾病預(yù)防控制中心（CDC）規(guī)定血中鉛含量不得高于10 μg/dL[1]。但是，目前還不知道究竟血中鉛濃度達(dá)到多少會(huì)對(duì)人體產(chǎn)生危害，在臨床檢驗(yàn)應(yīng)用時(shí)能夠提供準(zhǔn)確數(shù)值和精確測(cè)量的儀器也是很重要的。在臨床檢驗(yàn)應(yīng)用中采用橫向加熱技術(shù)石墨爐和塞曼效應(yīng)背景校正測(cè)定血中鉛原子吸收應(yīng) 用 文 章臨床檢驗(yàn)測(cè)定全血一般采用石墨爐原子吸收光譜法（GFAAS）。GFAAS具有成本效益，其檢出限遠(yuǎn)低于CDC規(guī)定血鉛濃度水平，而且相比于其他更先進(jìn)的元素分析技術(shù)，ＧＦＡＡＳ對(duì)操作人員的要求更低［２］。在本研究中，我們將對(duì)使用恒溫平臺(tái)石墨爐 （ＳＴＰＦ）和橫向加熱石墨管（ＴＨＧＡ）技術(shù)的PerkinElmer® PinAAcle™ 900T原子吸收光譜儀在臨床檢驗(yàn)中測(cè)定血液樣品中鉛含量的應(yīng)用性進(jìn)行驗(yàn)證。試驗(yàn)為了簡(jiǎn)化和減少分析時(shí)間，沒(méi)有使用與樣品基體匹配的血液標(biāo)準(zhǔn)和標(biāo)準(zhǔn)加入法制作校準(zhǔn)曲線，而采用水標(biāo)準(zhǔn)溶液。

實(shí)驗(yàn)試劑準(zhǔn)備所有試劑、標(biāo)準(zhǔn)和樣品均采用ASTM®I類去離子水(18MΩ • cm) 配制。濃硝酸（HNO3）（69-70%）為痕量金屬級(jí)或更高[3]。10% Triton® X-100儲(chǔ)備液：直接在125mL LDPE瓶中稱取10克Triton® X-100潤(rùn)濕劑(Part No. N9300260)，去離子水定容至100克，搖勻。自動(dòng)進(jìn)樣器清洗溶液：保證2L的自動(dòng)進(jìn)樣器清洗瓶中一直有去離子水，加入4mL濃硝酸和100 μL10%Triton® X-100溶液，搖勻。稀釋劑/基體改進(jìn)劑溶液：吸取1mL10%磷酸二氫銨（NH4H2PO4，基體改進(jìn)劑(Part No.N9303445)），加入到60mL LDPE瓶中，然后加入2.5 mL10% Triton®X-100儲(chǔ)備液和0.1 mL濃硝酸，最后用去離子水稀釋至50mL。1% HNO3溶液：在1L塑料容量瓶中先加入大約500mL去離子水，然后加入10mL濃硝酸，去離子水稀釋定容至刻度。標(biāo)準(zhǔn)溶液中間液(10 mg/L)：吸取1mL1000mg/L鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液儲(chǔ)備液(PerkinElmer Pure, Part No. N9300175)到125mLLDPE瓶中，用1% HNO3定容至100g。每月配制。

標(biāo)準(zhǔn)溶液配制和樣品處理在4個(gè)干凈的100mL塑料瓶中分別加入1, 2, 4, 6 mL10mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后用1% HNO3稀釋定容至刻度，則配制的二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度分別為100, 200, 400, 和 600μg/L。校準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)溶液：在4個(gè)1.2 mL干凈的自動(dòng)進(jìn)樣器樣品杯中分別吸取上述二級(jí)標(biāo)準(zhǔn)溶液各100μL，然后各加入900 μL稀釋劑/基體改進(jìn)劑溶液。在自動(dòng)進(jìn)樣器樣品杯中用移液器槍頭反復(fù)吹打5-10次以混勻樣品杯中的溶液。空白溶液的配制使用1% HNO3溶液按相同步驟進(jìn)行。樣品使用NIST®山羊血中微量元素(SRM955c)和LyphoChek全血金屬對(duì)照濃度1、2、3 (BioRad, 加州Hercules)。在1.2 mL自動(dòng)進(jìn)樣器樣品杯中直接吸取100 μL樣品和900μL稀釋劑/基體改進(jìn)劑溶液，照上述方法混勻

儀器條件實(shí)驗(yàn)所有的測(cè)量都使用PinAAcle 900T火焰和縱向塞曼石墨爐原子吸收光譜儀。光源使用PerkinElmerLumina™ Pb單元素空心陰極燈(Part No. N3050157)，氣體類型為氬氣。PinAAcle 900T的儀器設(shè)置列于表1，所有樣品測(cè)定的石墨爐程序列于表2。

雖然本實(shí)驗(yàn)校準(zhǔn)曲線最大濃度做到60 μg/dL (圖 4a)，但是研究發(fā)現(xiàn)儀器的線性可達(dá)到120μg/dL或者更高(圖4b)。這就為分析高濃度樣品時(shí)減少稀釋倍數(shù)提供了一種方法。多次測(cè)定血液稀釋溶液得到的檢出限約為0.23μg/dL (3SD)。由表3可見，測(cè)定4個(gè)濃度的NIST®標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)955c-山羊血中有毒金屬的回收率在98-102%范圍內(nèi)；而由表4可見，測(cè)定3濃度BioRad LyphoChek比對(duì)樣品的回收率在100-106%范圍內(nèi)。所有實(shí)驗(yàn)結(jié)果均在標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)推薦的范圍內(nèi)。

AS 900自動(dòng)進(jìn)樣器的使用保證了樣品傳輸?shù)臏?zhǔn)確性。AS 900自動(dòng)進(jìn)樣器探針在分析時(shí)不需要為了防止高濃度樣品對(duì)后續(xù)樣品的殘留污染而進(jìn)行任何清洗或維護(hù)。而且能夠在需要時(shí)對(duì)超過(guò)校準(zhǔn)曲線范圍的樣品進(jìn)行自動(dòng)稀釋。

結(jié)論本文介紹了如何利用我們的儀器在臨床檢驗(yàn)中測(cè)定血中Pb含量的實(shí)例。通過(guò)使用帶有恒溫平臺(tái)石墨爐(STPF)、石墨爐橫向加熱（THGA）系統(tǒng)的PinAAcle900T原子吸收光譜儀，使得臨床檢驗(yàn)中快速、準(zhǔn)確測(cè)定Pb成為可能。較寬的線性范圍既能滿足測(cè)定遠(yuǎn)低于臨界值10 μL/dL的樣品，也能滿足臨床和研究中測(cè)定較高濃度的需求。PinAAcle 900T原子吸收光譜儀非常適合臨床檢驗(yàn)測(cè)定血中鉛含量。