橫向加熱石墨爐原子吸收光譜測(cè)定血清中的鋁
前言:血清中鋁(Al)的測(cè)定是客戶驗(yàn)證應(yīng)用時(shí)實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目。石墨爐原子吸收光譜法(GFAAS)是客戶驗(yàn)證測(cè)定血清中鋁技術(shù)中少有的能夠滿足臨床靈敏度動(dòng)態(tài)范圍要求的常規(guī)技術(shù)之一。在使用GFAAS測(cè)定血清中鋁含量時(shí),分析人員必須要考慮到以下幾個(gè)影響分析結(jié)果的因素:血清基體中含有的有機(jī)碳水化合物和應(yīng)用中使用縱向塞曼背景校正技術(shù)橫向加熱石墨爐原子吸收光譜測(cè)定血清中的鋁原子吸收光譜應(yīng) 用 文 章相當(dāng)數(shù)量的無(wú)機(jī)鹽成分都會(huì)對(duì)GFAAS測(cè)定的準(zhǔn)確性造成干擾,這就意味著檢測(cè)時(shí)必須考慮減少這些干擾;此外,鋁也是在樣品前處理過(guò)程中容易由外部帶入污染的元素,因此在分析前,應(yīng)盡可能的減少實(shí)驗(yàn)操作人員對(duì)樣品的前處理,以減少樣品被污染的機(jī)會(huì)和降低污染的程度。
本研究將介紹了一種直接分析血清中鋁的簡(jiǎn)單方法。該方法使用水溶液標(biāo)準(zhǔn)配置校準(zhǔn)曲線,使用縱向塞曼背景校正技術(shù)、橫向加熱、等溫平臺(tái)石墨爐技術(shù),樣品用量少、,能夠滿足較大濃度范圍的血清樣品測(cè)試,而且將實(shí)驗(yàn)人員與樣品接觸的幾率降到了低。
實(shí)驗(yàn)部分試劑樣品稀釋劑/基體改進(jìn)劑混合溶液含有0.1%的硝酸(體積比)、0.01%的Triton X-100,以及0.2%的Mg(NO3)2?;旌先芤菏褂肁STM® I類水(18MΩ)、1% Mg(NO3)2 基體改進(jìn)劑 (Part No. B0190634)、Triton® X-100非離子型洗滌劑(Part No. N9300260)配制而成。儀器校準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)溶液由鋁標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液配制得到((PerkinElmer 鋁(Al)單元素高純標(biāo)準(zhǔn)溶液,Part No. N9300184))。雙濃度微量元素凍干血清比對(duì)樣品(UTAK®實(shí)驗(yàn)室,加利福尼亞州瓦倫西亞)。
儀器條件:本研究中所有的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)都采用PerkinElmer® PinAAcle™900T火焰和縱向塞曼石墨爐原子吸收光譜儀(圖1)。該儀器配置了橫向加熱石墨爐和縱向塞曼效應(yīng)背景校正。實(shí)驗(yàn)所有的分析都使用THGA標(biāo)準(zhǔn)石墨管(Part No.B0504033)。原子吸收光譜儀配有AS 900自動(dòng)進(jìn)樣器和2.5mL聚丙烯自動(dòng)進(jìn)樣器樣品杯(Part No. B3001566)。儀器操作軟件使用WinLab32™,計(jì)算機(jī)操作系統(tǒng)為Microsoft®Windows® 7
石墨管的設(shè)計(jì)對(duì)鋁元素測(cè)定的靈敏度和穩(wěn)定性都起著非常重要的作用。鋁會(huì)以穩(wěn)定的氧化物形式揮發(fā),由于揮發(fā)時(shí)的氣相溫度較低,因此在沒(méi)有等溫平臺(tái)的石墨管中進(jìn)行原子化時(shí)部分鋁會(huì)以氧化物的形式損失,而使用平臺(tái)原子化時(shí),這種因?yàn)榧訜岵痪鶆驅(qū)е碌膿p失降到了低,因而使得原子化效率提高了3倍。此外,設(shè)計(jì)的橫向加熱石墨管能夠保證整個(gè)管長(zhǎng)溫度傳導(dǎo)的一致,不僅確保靈敏度最大,而且消除了在沒(méi)有使用橫向加熱石墨管時(shí)由于兩端溫度相對(duì)較低造成氣相物質(zhì)在兩端重新結(jié)合而產(chǎn)生的干擾
集成了平臺(tái)的THGA管(圖2)由單塊石墨加工而成,并經(jīng)過(guò)熱解涂層,從而保證了石墨管的最佳性能和壽命
樣品分析將購(gòu)買的雙濃度凍干血清比對(duì)物質(zhì)按照生產(chǎn)商的說(shuō)明用實(shí)驗(yàn)室去離子水復(fù)原。因此,質(zhì)控樣品的處理采用和其他病人血清樣品同樣的處理方法,用移液器取1mL血清到洗凈的自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣杯中,然后加入1mL稀釋劑/基體改進(jìn)劑混合溶液,這樣得到1:1稀釋的血清溶液。用移液器反復(fù)吹吸直至溶液混合均勻。按同樣方法,將1mL去離子水和1mL稀釋劑/基體改進(jìn)劑混勻得到“稀釋劑空白”。鋁標(biāo)準(zhǔn)溶液用含有50%稀釋劑/基體改進(jìn)劑混合溶液的100μg/L鋁標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋得到。用不同體積的稀釋劑空白溶液將100μg/L鋁標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液分別稀釋成100, 50和25 μg/L3個(gè)濃度,儀器測(cè)定后得到多點(diǎn)校正曲線(圖3)。
結(jié)果特征質(zhì)量(M0)可以被定義為一個(gè)方法的靈敏度,即被注入到石墨爐中的元素產(chǎn)生背景校正信號(hào)為0.0044 Abs.sec的質(zhì)量。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)鋁的特征質(zhì)量是29pg,這與儀器生產(chǎn)廠商推薦的M0值31pg非常吻合。與水標(biāo)準(zhǔn)溶液相比,由于血清基體組成不同,因此在原子信號(hào)出現(xiàn)的時(shí)間和峰型上存在有細(xì)微差別(圖5)。然而在使用恒溫平臺(tái)石墨爐(STPF)時(shí)這就不是一個(gè)問(wèn)題,因?yàn)樵谶@種情況下,是對(duì)峰面積進(jìn)行處理,這樣整個(gè)鋁信號(hào)都被測(cè)定和定量,而與出峰時(shí)間和峰型無(wú)關(guān)。這種定量方法被用于所有的被分析物和樣品。
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